Los co-cultivos de neuronas / astrocitos derivados de células madre neurales humanas responden a la infección del virus La Crosse con citoquinas proinflamatorias y quimiocinas

Autor/autores: Brian E. Dawes, Junling Gao, Colm Atkins...(et.al)

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El virus La Crosse (LACV) causa encefalitis pediátrica en los EE. UU. La LACV induce una inflamación severa en el sistema nervioso central, pero el reclutamiento de células inflamatorias es poco conocido. Se necesita una comprensión más profunda de la patología neural inducida por LACV para desarrollar opciones de tratamiento. Sin embargo, existe una grave limitación de los modelos de células neuronales humanas relevantes de la infección por LACV.
Utilizamos co-cultivos de neuronas / astrocitos derivadas de células madre neurales humanas (hNSC) para estudiar la infección por LACV en células primarias relevantes para la enfermedad. Las hNSC se diferenciaron en neuronas y astrocitos y se infectaron con LACV. Para caracterizar la susceptibilidad y las respuestas a la infección, medimos los títulos víricos y los niveles de ARN viral, realizamos análisis de inmunofluorescencia para determinar los tipos de células infectadas, realizamos ensayos de apoptosis y citotoxicidad, y evaluamos las respuestas celulares a la infección mediante los ensayos de qRT-PCR y Bioplex.
Los co-cultivos de neuronas / astrocitos derivados de hNSC fueron susceptibles a la infección por LACV y mostraron respuestas apoptóticas como se informó en estudios previos in vitro e in vivo. Las neuronas y los astrocitos son ambos objetivos de la infección por LACV, y las neuronas se convierten en el objetivo predominante más adelante en la infección, posiblemente debido a las respuestas astrocíticas al IFN. Además, los co-cultivos de neuronas / astrocitos respondieron a la infección por LACV con citoquinas proinflamatorias fuertes, quimiocinas, así como respuestas de MMP-2, MMP-7 y TIMP-1.
Los co-cultivos de neuronas / astrocitos derivados de hNSC reproducen aspectos clave de la infección por LACV en humanos y ratones y son modelos útiles para estudiar virus encefalíticos. Específicamente, mostramos que los astrocitos son susceptibles a la infección por LACV y que las neuronas y los astrocitos son importantes impulsores de las respuestas inflamatorias observadas en la infección por LACV a través de la producción de citoquinas proinflamatorias y quimiocinas.

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