El metil jazonato protege las células microgliales contra el estrés oxidativo inducido por β-amiloide y la inflamación a través de la vía HO-1 dependiente de Nrf2

El β-amiloide (Aβ) induce estrés oxidativo e inflamación de las células microgliales. Se informa que el jasmonato de metilo (MeJA) tiene efectos antiinflamatorios y antioxidantes. Sin embargo, los roles potenciales de MeJA en las actividades celulares inducidas por Aβ y el mecanismo subyacente no están claros.

La línea celular microglial BV-2 fue estimulada por Aβ 20 μM y / o MeJA 20 μM y luego dividida en cuatro grupos (control, Aβ, MeJA y Aβ + MeJA). La viabilidad celular se detectó mediante el ensayo MTT. MDA, actividad SOD y ROS se detectaron por espectrofotometría de fluorescencia y ensayo de inmunofluorescencia. Nrf2 y HO-1 se detectaron por qRT-PCR y Western blot. Además, se detectaron citocinas inflamatorias (p-NFκB, TLR4, TNF-α, IL-1β e IL-6) y factores de apoptosis (Bcl-2, Bax y cl-casp-3) mediante Western blot. El ensayo TUNEL se aplicó para investigar la tasa de apoptosis. Además, el mecanismo de cómo MeJA jugó el estrés antioxidante y los roles antiinflamatorios se investigó mediante el silenciamiento de Nrf2 a través de siRNA.

El resultado del ensayo MTT mostró que MeJA mejoró la viabilidad disminuida de las células BV-2 inducidas por Aβ. La detección de MDA, actividad de SOD y ROS mostró que los niveles de estrés oxidativo disminuyeron en el grupo Aβ + MeJA en comparación con el grupo Aβ. Nrf2, HO-1 y SOD estaban significativamente regulados por incremento en el grupo Aβ + MeJA en comparación con el grupo Aβ (p <0. 01). Por el contrario, las citocinas inflamatorias estaban significativamente reguladas negativamente en el grupo Aβ + MeJA en comparación con el grupo Aβ (p <0. 05). Del mismo modo, las expresiones de las citocinas de apoptosis y el ensayo TUNEL sugirieron una disminución de la tasa de apoptosis en el grupo Aβ + MeJA en comparación con el grupo Aβ (p <0. 01).

Finalmente, los resultados del experimento de eliminación de Nrf2 mostraron una disminución de la regulación de los factores de estrés antioxidante (Nrf2, HO-1 y SOD), una mayor regulación de las citocinas inflamatorias y una mayor proporción de Bax a Bcl en el grupo Aβ + MeJA + si-Nrf2 en comparación con el grupo Aβ + MeJA (p <0. 01).

MeJA podría aliviar el estrés oxidativo inducido por Aβ y la respuesta inflamatoria en las células microgliales mediante la activación de la vía Nrf2 / HO-1.

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